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嘮叨一下“實驗室樣品前處理”

更新時間:2022-10-19    瀏覽量:435

 實驗室,顧名思義是進行實驗的場所,諸多科技的進步無不源于此。它對科學(xué)研究有著重要的意義,對科技發(fā)展起著非常重要的使用。在一些重要的科研領(lǐng)域,我們國家設(shè)有專門的實驗室,謂之國家重點實驗室。這些實驗室信托單位以中科院各研究所、重點大學(xué)為主體,開展基礎(chǔ)研究以及探索科學(xué)技術(shù)前沿。

 

在許多實驗室,如蛋白組學(xué)、藥物化學(xué)&分析、RNA&DNA研究、寡聚合物和肽、藥物代謝藥物研究等,為了得到有效樣品進行分析研究,必須進行一些前處理工作。常用的方法有以下幾種:


 第一、  氣流吹蒸法。通常采用氮氣,因為氮氣是一種不活潑的氣體,可以起到隔絕氧氣的作用,防止氧化。將氮氣快速、連續(xù)、可控的吹到加熱樣品表面,實現(xiàn)大量樣品的快速濃縮。

優(yōu)點:

+揮發(fā)性溶劑濃縮速度很快;

+價格優(yōu)勢比較大;

存在的主要問題:

-樣品回收率低,容易掛壁;

-蒸汽在噴嘴處冷凝,容易造成交叉污染;

-溶劑不能回收,容易污染環(huán)境,不環(huán)保,須在通風(fēng)櫥內(nèi)使用;

-對于高沸點或者難揮發(fā)的溶劑,速度會非常慢;

-需要不斷消耗氮氣,亦是一種損耗;

-像石油醚等高易燃物質(zhì)不適宜使用。



       第二、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,在真空條件下,恒溫加熱,使蒸發(fā)瓶恒速旋轉(zhuǎn),增大蒸發(fā)面積,真空泵的作用下,蒸發(fā)瓶處于負壓狀態(tài),溶劑在瓶壁形成大面積薄膜,高效擴散蒸發(fā)。蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝器冷卻,回流于接收瓶中,大大提高蒸發(fā)效率。

       優(yōu)點:

       +處理單一樣品量大;

       +揮發(fā)性溶劑速度很快,特別適用對高溫容易分解變性的生物制品的濃縮提純;

       缺點:

      -單次只能處理一個樣品;

      -手動操作;

      -易爆沸,危險性高;

      -微量樣品不能處理。


       

      第三、  凍干濃縮法,由物理學(xué)可知,水有三相,O點為三相共點,OA為冰的融解點。根據(jù)壓力減小、沸點下降的原理,只要壓力在三相點壓力之下,物料中的水分則可從水不經(jīng)過液相而直接升華為水汽。根據(jù)這個原理,就可以先將濕原料凍結(jié)至冰點之下,使原料中的水分變?yōu)楣虘B(tài)冰,然后在適當?shù)恼婵窄h(huán)境下,將冰直接轉(zhuǎn)化為蒸汽而除去,再用真空系統(tǒng)中的水汽凝結(jié)器將水蒸汽冷凝,從而使物料得到干燥。

       優(yōu)點:

       +最終樣品為絨狀,干燥(粉末);

       +可凍干固體;

       缺點:

      -速度非常慢;

      -溶劑的樣品形式有限制;

      -有機溶劑類不適合:

      -凍干起泡


      第四、真空離心濃縮。綜合利用離心力、加熱和外接真空泵提供的真空作用來進行溶劑蒸發(fā),并通過超低溫的冷阱捕捉溶劑,從而將溶劑快速蒸發(fā)達到濃縮或干燥樣品的目的。離心濃縮后的樣品可方便地用于各種定性和定量分析。

優(yōu)點:

+樣品低溫:避免樣本丟失、變性、活性下降、氧化;

+高通量:同時可處理幾十個樣品且可避免交叉污染;

+環(huán)保:有冷阱溶劑回收,解放通風(fēng)櫥;

+樣品得到率非常高;

+操作簡便,一健啟動;

+無需耗材;


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